一、肾为先天之本与老年痴呆相关基因研究的启示（论文文献综述）
张蒙[1]（2021）在《中医“益智”理论研究》文中研究指明本文选择中医理论中的“益智”作为研究对象,从其源流考证入手,阐释中医“益智”理论体系,以及在临床疾病治疗中的应用情况。正文分为七个部分:第一部分,探究了“智”的概念。在《说文解字》中有:“智,识词也。从白从亏从知。”古代文献对“智”五个方面的释义:聪明、才智、能认识事物的规律、能明辨是非曲直以及做事讲究谋略。可将我国古代“智”的定义可总结为:有聪明的头脑,具有良好的处事能力,并有正确的是非观。第二部分,本文研究了中医学“智”的内涵。在中医学认识中,与“智”的定义有交叉、包含或关联关系的有:五神、精、脑等。“智”的生成与五脏及气血津液息息相关。神为人之主宰,魂可助神做出较快的意识反应活动,魄主人体四肢与五官的感觉活动,意为人之记忆、意念,志为坚定的决心。智既是五神的综合体现,又是五神的最高级表现形式。心为君主之官,主神明,主记忆;肝为将军之官,主谋略,主决断;脾为在志为思,主思维;肺藏魄,主感知;肾为作强之官,伎巧出焉,主创造。而智的内涵包括:记忆能力、决断能力、思维能力、创造能力以及人体的基础感知能力,智的功能来源于五脏。第三部分,是对于生理性智力减弱的因素分析和两种常见的智力减弱疾病的症状及诊疗举隅。生理性智力减弱的因素分为先天因素和后天因素,可通过相应的方法进行调摄可在一定程度上恢复智力。以智力降低为主要表现的疾病有健忘和痴呆,主要治法为补益肝肾、益气活血等。第四部分,是“益智”的源流探讨。首先对“益”字进行考证,《说文解字》:“益,饶也。从水、皿。皿,益之意也。”其在古代文献中常用含义为增加或者是更加。在先秦两汉时期,《黄帝内经》初步建立了“益智”理论基础,在此时期的着作中可散见一些具有益智作用的药物;魏晋南北朝时期,医家注重养心开窍;到了隋唐时期,理论进一步发展,出现益智专方,此时期的治疗以补益心肾为主;两宋时期,医家则重于补益心脾并养血;金元时期,疫病流行,医家开始关注外邪对神志的影响,在隋唐时期补益心肾的基础上,主张运用疏风清热之法。明清时期,医家集历代的益智理论与实践之大成,认为益智需交通心肾,并对心肾之交的机理进行了深入的探讨。第五部分,是对“益智”理论的研究。益智与五脏及气血津液的关系密切。一是通过补心之气血,疏肝气、补肝血,运脾升清、补脾统血,补足肺气,补肾填精、补肾纳气,调节气机、补血行血、补充津液之法达到益智的效果。二是通过调节情志而达到益智目的。第六部分,关于“益智”方法的研究。“益智”方法包括方药、针灸、养生等措施。在方药益智治疗方面,从脏腑及气血津液的调节入手,分别列出对应方与药。在针灸益智治疗方面,通过对针灸名着中的益智作用穴位的所在的经络进行统计,发现近半数的穴位在心经、心包经、任脉和督脉上。说明针灸益智的经络以此四条为主。在中医养生益智方面,使用调节睡眠、饮食、运动、情志等日常生活的状态来益智。睡眠的养生方法主要在于:根据四季变化,规律起卧时间;调整睡眠卧向,东西朝向为佳;矫正睡眠姿势,侧卧为佳。我国有悠久的食疗历史,汉代《神农本草经》中明确标有“益智”、“强志”、“增慧智”、“聪察”、“不忘”、“填髓脑”等功效的药物达43味。如龙胆“久服,益智,不忘,轻身,耐老”;木香“主邪气,辟毒疫温鬼,强志,主淋露”。（有关食疗的食物要列上,而不是列出药物!）魏晋时期《名医别录》中记载的粳米、狗肉有益智填精、强志补中之效。到唐代《千金要方》中首次出现食疗专篇。《千金翼方》中有记载益智功效之药物69味,具有益智功能的药物有 种。（要把有食疗作用的食物列出来,不是药手）如赤石脂“久服补髓,好颜色,益智不饥,轻身延年。”宋代官修的《太平圣惠方》中第九十六卷和九十七卷是食治篇,其中药膳食疗法丰富,如鸡头实粥可“益精气。强志意。聪利耳目”。元代的《饮膳正要》中的神仙服食篇记载了大量的益智延年轻身的药食。还有一些着作中记载了偏食可能会导致智力的下降。常人都会产生各种情绪,正常的情志活动于身心并无损害。喜、怒、忧、思、悲、恐、惊,若是超过一定限度则会危害智力,如《彭祖摄生养性论》言:“喜怒过多,神不归室。”喜怒太过则扰动神气,致使神气浮散不藏。朱震亨指出,“忧思过度可损及心胸,导致神识不清,进而喜忘”。认为忧虑过度可引起记忆力的减退。所以要养生益智,则需防止七情过极,修身养性,节制欲望。五禽戏和八段锦都是我国的传统养生功法,二者皆为强度较低的有氧运动。“静以养神,动以养形”,动静结合可形神皆养,有益智作用。《养性延命录》及《养生导引法》皆有华佗之弟子吴普,行五禽戏从而延年益寿的记录:“广陵吴普,行五禽戏,年逾九十,耳目聪明,牙齿坚完,吃食如少壮也”。五禽戏中的猿戏属火,坚持练习猿戏,可养心补脑,生髓益智。第七部分,是“益智”理论对于现代的指导意义,包括智力的维持、恢复和提升三个层次。本研究对中医“益智”理论进行了系统的阐明。以整体观念为基石,全面地将智与五神、精、脑、五脏及气血津液联系起来,形成对中医“益智”理论的认识。
刘南阳[2]（2021）在《还脑益聪方通过干预PS/γ-分泌酶/α-Nrxn 1通路调节阿尔茨海默病突触可塑性的实验研究》文中研究表明第一部分:目的:采用系统评价再评价方法对现有中医药治疗阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的系统评价/meta分析的质量进行评价,为中医药治疗AD的疗效及安全性提供证据。方法:检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方数据库和维普数据库,筛选中医药治疗AD的系统评价/meta分析,文献发表日期限定在从建库开始到2020年12月14日。两名研究者参考纳入和排除标准独立筛选文献和提取数据。采用系统评价方法学质量-2（AMSTAR-2）评价纳入研究的方法学,结局测量的证据等级质量由建议、评估、发展和评价分级（GRADE）量表评估。采用定性和定量相结合的方法阐述研究结果。定性研究主要描述AMSTAR-2和GRADE结果,定量研究以森林图形式表示。结果:共20篇系统评价/meta分析符合纳入标准。主要结局指标评估包括:日常生活能力（ADL）、简易智力状态检测（MMSE）、阿尔茨海默病评定量表-认知（ADAS-Cog）、中医证候疗效、中医证候积分、不良事件发生率、总有效率、蒙特利尔认知评估（MoCA）、长谷川痴呆（HDS）、临床痴呆评定（CDR）。根据AMSTAR-2的结果,2项研究被评为低质量,18项研究被评为极低质量。在GRADE分级中,未发现高质量的证据,仅3项研究的有效率、MMSE和ADL被评为中等质量,其余研究被评为低或极低质量。在降级因素中,原始试验中的偏倚风险排在第一位,其次是发表偏倚、不一致性和不精确性。所有研究未发现升级因素。仅2项研究量化了不良事件发生率,证据质量均为极低级。14项针对总有效率的研究结果显示治疗组总有效率显着高于对照组（OR=1.44;95%CI=1.29-1.62）;19项研究合并结果显示治疗组显着改善MMSE评分（WMD=1.19;95%CI=0.80-1.57）;16项研究合并结果显示治疗组与对照组在改善ADL评分方面差异无统计学意义（WMD=-0.19;95%CI=-0.92-0.54）;3项研究合并结果显示治疗组可显着改善AD患者中医证候积分（WMD=4.26;95%CI=3.22-5.30）。7项研究合并结果显示治疗组与对照组在改善ADAS-Cog评分方面差异无统计学意义（WMD=-0.96;95%CI=-2.12-0.21）。结论:中医药或联合西药治疗AD总有效率高于单纯西药或安慰剂,有效改善患者认知功能。然而,基于AMSTAR-2质量评价和GRADE分级发现现有中医药治疗AD的证据质量较低,目前尚不能提供强有力的推荐。此外,基于现有证据无法评估中医药治疗AD的安全性,未来需开展更多设计严谨的高质量的系统评价/Meta分析,以提供更多的证据支持。第二部分:目的:观察还脑益聪方（HYD）通过干预PS/γ-分泌酶/α-Nrxn 1通路对早老素双基因敲除小鼠（PScDKO）突触可塑性的影响,探讨HYD治疗AD的潜在机制。方法:3月龄PScDKO小鼠随机分为6组,包括模型Ⅰ组、模型Ⅱ组、γ-分泌酶抑制剂组（DAPT组）、HYD低剂量组、HYD中剂量组和HYD高剂量组,每组16只,相同遗传学背景的C57小鼠16只为空白对照组。空白组和模型Ⅰ组每日予生理盐水灌胃,DAPT组每日腹腔注射5.0mg/kg,模型Ⅱ组每日予DAPT组等量生理盐水腹腔注射。HYD低、中、高剂量组每日给予HYD提取物1.7g/Kg、3.4 g/Kg、6.8g/Kg灌胃,每日一次,连续给药3个月。水迷宫和跳台实验分别观察小鼠空间学习记忆和记忆保持能力,电生理检测兴奋性突触后电位长时程增强时间,透射电镜观察突触形态和数量,HE染色和尼氏染色观察海马CA1区神经元形态和尼氏小体,酶联免疫吸附法检测γ-分泌酶、APP、Aβ1-40、Aβ1-40水平,免疫共沉淀法观察α-Nrxn1与α-DG、Cstn3、Nxph1的结合作用,免疫印迹法和实时荧光定量PCR法分别检测α-Nrxn1通路相关蛋白和基因表达水平。结果:电生理实验显示模型组兴奋性突触后电位斜率明显低于空白组（P<0.05）。药物干预后,HYD高剂量组长时程增强持续时间较模型Ⅰ组增加（P<0.05）。透射电镜结果显示HYD高剂量组突触数量较模型组明显增多,突触后致密物颜色较深。水迷宫实验发现模型Ⅰ组的穿台次数、原平台象限路程比和原平台象限时间比均减少（P<0.05）。HYD低剂量组穿台次数比模型Ⅰ组增加（P<0.05）。HYD低、中、高剂量组的错误次数均明显降低（P<0.05）。模型组海马CA1区形态紊乱,用药各组均能在一定程度上改善异常的形态。用药各组海马CA1区细胞排列较整齐,细胞坏死不明显,尼氏小体较模型组增加。研究发现PScDKO小鼠突触可塑性损伤与Aβ沉积无关。PS功能失活未破坏α-Nrxn 1与突触后蛋白的结合作用。模型小鼠中α-Nrxn1、Nxph 1和GluRδ2的蛋白和基因表达水平均下调（P<0.05）,用药后的表达水平均上调（P<0.05）。PS功能失活导致α-DG、Cstn3和AchE的蛋白和基因表达水平上调（P<0.05）,用药后的表达水平均有不同程度的降低（P<0.05）。结论:HYD可能通过调节α-Nrxn 1通路蛋白和基因表达水平改善PScDKO异常的突触可塑性从而发挥治疗AD的作用。
李健阳[3]（2021）在《绝经后妇女骨量丢失阶段证候分析及绝经后骨质疏松症肾阴虚证关联基因CLCF1的机制研究》文中研究指明目的1.分析绝经后妇女在骨量丢失阶段、各年龄段的中医证候特征。2.将绝经后妇女依据中医辨证、骨量丢失阶段、骨折史进行分组,比较CLCF1的表达差异,进一步验证CLCF1与PMOP肾阴虚证的相关性。3.探究调控CLCF1对OPG/RANKL/RANK系统的影响。方法1.通过回顾性研究2007年至2020年收集的2823例骨量丢失阶段的资料,分析福州地区绝经后妇女在骨量丢失阶段的症状、证候、兼证特征。2.将骨质疏松诊断与中医辨证结合,对受试者进行分组后,检测外周血单个核细胞中CLCF1的m RNA、蛋白水平,比较CLCF1在各组的表达差异。3.使用过表达技术、CRISPR/Cas9技术敲除THP-1细胞中的CLCF1基因,检测OPG、RANKL、IFNα、IFNγ的表达变化,检测THP-1细胞生物行为学的变化。结果1.在各阶段,症状比例最高的为健忘,且随骨量丢失的程度加重,发脱齿摇、下肢抽筋、口干咽燥、失眠、倦怠乏力、头晕、耳鸣、多梦、畏寒肢冷、胸闷、目眩的比例呈线性上升趋势（P<0.05）;肢体麻木的比例呈线性下降趋势（P<0.05）。在各阶段,虚证比例最高的为肾虚,且随骨量丢失的程度加重,肾虚、心虚、肝虚、脾虚、气虚比例呈线性上升趋势（P<0.05）。在各阶段,肾虚兼证比例最高的为心虚、脾虚,且随骨量丢失的程度加重,肾虚兼心虚、肾虚兼脾虚的比例呈线性上升趋势（P<0.05）。在各阶段,常见证型比例最高的为肾虚血瘀,且随骨量丢失的程度加重,肾虚血瘀的比例呈线性上升趋势（P<0.05）。在各阶段的各年龄段,主要症状、虚证、肾虚兼证、常见证型基本与各阶段整体特征相符。2.在中医证型分组中,PMOP肾阴虚组的CLCF1蛋白水平显着低于无PMOP肾阴虚组、PMOP无肾虚组（P<0.05）,且PMOP肾阴虚组的CLCF1蛋白水平具有低于无PMOP对照组的趋势（P>0.05）;在骨量丢失分组中,骨质疏松组的CLCF1蛋白水平低于骨量正常组（P<0.05）;在骨折史分组中,骨折组的CLCF1蛋白水平具有低于无骨折组的趋势（P>0.05）。此外,CLCF1蛋白水平与腰椎骨密度呈显着正相关关系（r>0,P<0.05）,与骨质疏松的发生呈显着负相关关系（r<0,P<0.05）,与骨折的发生呈不显着的负相关关系（r<0,P>0.05）。3.CLCF1过表达后,OPG蛋白表达上升（P<0.05）,RANKL蛋白表达无明显变化（P>0.05）,OPG/RANKL比值显着上升（P<0.01）,IFNα、IFNγ蛋白表达下降（P<0.05）,THP-1细胞的增殖、迁移、侵袭能力升高（P<0.05）;CLCF1敲除后,OPG蛋白表达下降（P<0.05）,RANKL蛋白表达无明显变化（P>0.05）,OPG/RANKL比值具有下降趋势（P>0.05）,IFNα、IFNγ的蛋白表达上升（P<0.05）,THP-1细胞的增殖、迁移、侵袭能力下降（P<0.05）,早期凋亡率上升（P<0.05）。结论1.大多数绝经后妇女在低骨量阶段已表现健忘、腰脊痛、发脱齿摇、腰膝酸软、下肢抽筋等症状,与肾阴虚证相关,且与骨质疏松阶段、严重骨质疏松阶段主要症状相同,其比例随骨量丢失加重而上升,提示临床应尽早干预,缓解症状。2.骨量丢失阶段均表现出肾虚、肝虚为主的虚证,肝肾阴虚、肾虚血瘀为主的临床常见证型,且肾虚的兼证以肝虚、心虚、脾虚为主,提示OP的证型复杂,临床防治应以肝肾为主,同时重视心虚等兼证的治疗。3.CLCF1是PMOP肾阴虚证的关联基因,其蛋白表达与腰椎骨密度呈显着正相关关系,与骨质疏松的发生呈显着负相关关系,有望为PMOP肾阴虚证的分子标志物、治疗靶点。4.CLCF1的表达变化会影响OPG/RANKL/RANK系统,从而参与骨代谢,有望成为骨代谢疾病的治疗靶点。
赵明[4]（2021）在《阿尔茨海默病关键基因筛选及龟龄集干预作用的研究》文中研究说明阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一种进行性神经退行性疾病,发病率呈不断上升趋势,给患者家庭及人类社会带来了巨大的压力和挑战。现代医学对AD的治疗效果不佳,中医药对痴呆的认识历史悠久,中药复方以其多靶点、多途径、协同增效的特点,发挥对AD的整体治疗作用。龟龄集作为着名的补肾抗衰老名方,具有固补肾气、强身健脑等功效,探索其对AD的治疗作用和潜在作用机制,对中医药防治AD具有重要的意义。目的:评价龟龄集治疗AD的临床疗效,利用生物信息学分析方法探讨龟龄集治疗AD的可能机制,为龟龄集治疗AD的临床应用提供科学依据。方法:1临床研究:实行双盲、双模拟的随机对照试验,一共纳入AD（肾虚髓减证）患者60例,分为试验组和对照组。试验组给予龟龄集胶囊+银杏叶片模拟剂治疗,对照组给予银杏叶片+龟龄集胶囊模拟剂治疗,总疗程为24周。观察治疗前后患者的MMSE、ADAS-cog、ADL、中医证候评分变化情况及药物安全性。2生物信息学分析的筛选和验证:从GEO数据库获取AD患者基因芯片数据集,从样本来源为脑颞中回组织的GSE132903数据集中筛选差异基因,进一步对差异基因行WGCNA分析,以获取与AD显着相关的差异表达基因。运用DAVID数据库对与AD显着相关的DEGs行GO富集分析和KEGG通路富集分析。并通过STRING数据库构建蛋白相互作用网络,利用Cytoscape软件以提取关键基因。通过样本来源为血液组织的GSE63060数据集中的差异基因与从脑颞中回组织筛选出来的关键基因取交集,以此筛选出AD患者脑血协同表达的关键基因。取服用龟龄集的AD患者的血液样本与非AD对照组血液样本进行比较,验证AD患者血液中关键基因的表达情况,并检测龟龄集对这些关键基因表达情况的影响。结果:1临床研究结果:（1）主要疗效指标:与治疗前相比,治疗12周和治疗24周试验组和对照组MMSE总评分均明显升高,有统计学差异（P<0.01）;组间比较,治疗12周和治疗24周两组MMSE总评分无统计学差异（P>0.05）。与治疗前相比,治疗12周和治疗24周试验组和对照组ADAS-cog总评分均明显下降,有统计学差异（P<0.01）;组间比较,治疗12周和治疗24周两组ADAS-cog总评分无统计学差异（P>0.05）。（2）次要疗效指标:与治疗前比,治疗12周和治疗24周试验组和对照组中医证候评分量表总分均明显下降,有统计学差异（P<0.01）;组间比较,治疗12周和治疗24周两组中医证候评分量表总分无统计学差异（P>0.05）。与治疗前比,试验组和对照组ADL总积分均明显下降（P<0.01）;组间比较,治疗12周和治疗24周两组ADL总积分无统计学差异（P>0.05）。（3）安全性评价:两组患者在治疗期间均未出现不良反应,治疗期间两组患者血常规、尿常规、粪便常规、肝功能、肾功能、心电图均未见明显异常变化。2生物信息学分析结果:从GSE132903数据集中共筛选出755个DEGs。这些DEGs的WGCNA分析显示绿松石色模块聚集的364个DEGs与AD呈显着负相关。这364个与AD显着相关DEGs的GO富集分析显示,在生物学过程层面,与AD显着相关的DEGs主要涉及细胞器定位的建立、信号释放、突触组织等。在细胞学组件层面,DEGs主要涉及突触前、谷氨酸能突触、细胞前沿等。在分子功能层面,DEGs主要涉及钙调蛋白结合、通道调节器活动、离子通道调节剂活性等。KEGG通路分析显示,DEGs参与的生物通路主要涉及钙信号通路、cGMP-PKG信号通路、GABA能突触等。蛋白相互作用网络分析富集程度最高的前20个关键基因为:SYT1、ITSN1、AMPH、DNM3、CLTA、NECAP1、REPS2、GABRG2、GFAP、GABRA1、DNF、ITPR1、ITPR3、ATP2A2、PPP3CB、NRXN1、GAD1、SST、NPY、PPP3CA。AD患者脑血协同表达的关键基因为PPP3CB和ITPR3。3 RT-PCR验证及龟龄集干预后结果:与非AD对照组比,PPP3CB在AD患者血液中显着低表达（P<0.01）。非AD对照组和AD组之间的ITPR3在血液中的表达无统计学差异（P>0.05）。龟龄集干预后能显着上调AD组血液中PPP3CB的表达,有统计学差异（P<0.05）。结论:1临床研究结论:龟龄集可以增加轻中度AD（肾虚髓减证）患者的MMSE评分,降低ADAS-cog、ADL评分和中医证候评分,改善AD患者认知功能和日常生活能力。治疗期间无不良反应,安全性良好。2生信分析及RT-PCR验证结论:PPP3CB在AD患者血清中显着下调,龟龄集可显着上调AD患者中PPP3CB的表达,龟龄集可能通过调节PPP3CB而发挥对AD的治疗作用。
谭爱华[5]（2021）在《痰瘀同治 清热解毒法防治AD的理论探讨及其调控HSP70介导的神经保护机制研究》文中研究指明目的:通过理论研究初步提出较为系统的AD病变全过程的病机演变规律,探析由因虚生热和痰瘀化热导致的“热”推动AD病变发展这一重要病机,及AD病理变化的四个关键过程:“虚生痰瘀-痰瘀化热-热结酿毒-毒损脑络”,探讨AD病理进程中的“热”和“毒”的理论内涵,梳理痰瘀同治、清热解毒法防治AD的理论依据。通过实验研究探索建立稳定可靠的AD-痰瘀互结病证结合动物模型,解析痰瘀同治、清热解毒法对AD-痰瘀互结病证结合动物模型的干预作用及其可能的作用机制,阐明痰、瘀在AD的病理变化过程中存在“化热”这一关键过程,并尝试揭示“痰瘀化热酿毒”“毒损脑络”的生物学过程以及“热”和“毒”可能的生物学基础,初步证实痰瘀同治、清热解毒法可通过调控HSP70介导的神经保护机制发挥改善脑神经炎症、改善海马神经元突触结构和可塑性、抑制神经元凋亡等作用。方法:1、理论研究方法:以《古今图书集成医部全录》、《四库全书》子部、《中华医典》（第5版）为主要工具,综合古今医家之言,系统梳理虚、痰、瘀及痰瘀互结、化热酿毒、毒损脑络这些因素和环节与AD的关联,整理中医学对AD病变全过程的病机演变认识,探析“热”和“毒”的理论内涵,梳理痰瘀同治、清热解毒法防治AD的的理论依据。2、实验研究方法:（1）以3月龄APP/PS1双转基因小鼠作为AD的疾病模型动物,用D12492高脂饮食饲喂,改变其血脂指标,以模拟中医“痰”证的病理状态;用0℃冰水浴处理,改变其血液流变指标,以模拟中医“瘀”证的病理状态;二者结合模拟同时存在“痰”“瘀”的病理状态,分别建立AD-痰、瘀、痰瘀互结病证结合动物模型。通过比较各组小鼠的学习与记忆能力,舌色客观变化,以及血脂、血液流变学、脑神经炎症、AD相关病理变化的指标来评价模型,探索建立稳定可靠的AD-痰、瘀、痰瘀互结病证结合动物模型。（2）复制AD-痰瘀互结证病证结合动物模型,分为5个组:不予给药处理的模型组、给予痰瘀同治的益智温胆汤组、给予清热解毒的黄连解毒汤组、同时给予痰瘀同治和清热解毒的益智温胆汤+黄连解毒汤组,以及作用机制对照药物替普瑞酮组,并以同系遗传背景的非转基因C57小鼠作为空白对照组,分别处理40天。Morris水迷宫法检测各组小鼠学习记忆能力;刚果红染色法、甘氨酸镀银染色法、透射电镜法、高尔基染色法等方法分别观察各组小鼠海马区SP、NFTs、神经元超微结构变化、突触和树突棘的改变等;使用免疫荧光标记法,Western Blot法检测各组小鼠海马组织内相关蛋白的表达和共定位关系,比较各组小鼠的病理改变、脑神经炎症、凋亡、突触、线粒体功能等的变化情况。结果:1、实验一结果（1）Morris水迷宫:与AD-Model组比较,各组小鼠的平均游泳速度差异无统计学意义。Control组小鼠游泳总路程和上平台潜伏期明显更短,穿越平台次数明显更多,其余各组小鼠的游泳总路程、上平台潜伏期和穿越平台次数差异无统计学意义。（2）舌色对比:与AD-Model组小鼠相比,Control组小鼠舌色偏淡红,其余各组小鼠舌色偏暗红。AD-Pbs组小鼠的舌色r值最小。（3）血液流变学指标检测:与AD-Model组小鼠相比,Control组小鼠全血黏度和血浆黏度更低。其余各组小鼠的全血黏度和血浆黏度均有不同程度升高。而与AD-Model组小鼠相比,AD-Bss组和AD-Pbs组小鼠的全血黏度和血浆黏度更高。（4）血脂指标检测:与AD-Model组小鼠相比,Control组小鼠血脂指标差异无统计学意义。其余各组小鼠的血脂指标均有不同程度升高,与AD-Model组小鼠相比,AD-Ps组和AD-Pbs组小鼠的各项血脂指标更高,但其差异不具有统计学意义。（5）Western Blot:与Control组小鼠相比,各组小鼠的海马组织TNF-α、IL-1β和T-Tau均明显升高。与AD-Model组小鼠比较,AD-Pbs组小鼠海马组织中的TNF-α、IL-1β和T-Tau的差异具有统计学意义。2、实验二结果:（1）Morris水迷宫:与Control组比较,各组小鼠游泳总路程和上平台潜伏期明显延长,穿越平台次数明显减少。与Model组比较,各组小鼠平均游泳速度差异无统计学意义,各给药组小鼠游泳总路程和上平台潜伏期均缩短,穿越平台次数有不同程度的增加。（2）跳台实验:与Control组比较,各组小鼠潜伏期明显缩短、出错次数增加;与Model组比较,各给药组小鼠潜伏期延长、出错次数减少。3、实验三结果:（1）刚果红染色:Control组小鼠海马区和皮层中几乎没有观察到SP,而Model组小鼠海马区和皮层中散在分布着许多SP,各给药组SP均有不同程度的减少。（2）甘氨酸银浸镀:与Control组小鼠相比,Model组小鼠海马区染色明显加深,镜下可见大量被染成黑色条状的NFTs,以CA3区最为明显;各给药组小鼠海马区的NFTs有不同程度减少。（3）透射电镜:Control组小鼠海马神经元细胞结构完整,染色质团聚在核内,线粒体丰富,核糖体和粗面内质网均匀散在分布在胞质中。Model组小鼠海马神经元出现细胞死亡现象,镜下可见细胞核塌陷,边界破解甚至消失,染色质固缩或消失,视野内可见若干凋亡小体分布,线粒体数量明显减少,且大部分线粒体出现肿胀甚至破裂,粗面内质网结构松散,仅可见少量零星分布的核糖体。各给药组小鼠海马神经元也存在不同程度的损伤,但细胞核整体形态正常、结构完整,镜下可见部分线粒体肿胀,粗面内质网排列松散,核糖体减少等现象。（4）Western Blot:与Control组小鼠比较,各组小鼠总Tau蛋白和三个不同位点磷酸化的Tau蛋白含量均有不同程度的升高,与Model组小鼠相比,各给药组小鼠总Tau蛋白和三个不同位点磷酸化的Tau蛋白均有不同程度的减少。4、实验四结果:（1）免疫荧光:与Control组小鼠相比:Model组小鼠海马区Aβ1-42、GFAP、Iba-1、的荧光数量和强度均明显上升,DG区Aβ1-42蛋白的周围分布着大量的GFAP蛋白和Iba-1蛋白;PSD95荧光数量和强度明显减少;Model组小鼠皮层和海马区均可见大量HSP70荧光,各给药组小鼠皮层和海马各个区域的HSP70荧光数量和强度均有不同程度的增强,CA3区和DG区更为明显。与Model组小鼠相比,各个给药组小鼠海马区Aβ1-42蛋白、GFAP蛋白和Iba-1蛋白荧光数量和荧光强度均不同程度的降低,PSD95荧光数量和强度有不同程度增加。（2）HSP70和Aβ1-42、Tau荧光共定位:胞内外均可见由HSP70的红色荧光和Aβ1-42的绿色荧光重叠的黄色荧光。由红色荧光的HSP70和绿色荧光的Tau重叠的黄色荧光,几乎都分布在胞外。（3）Western Blot:与Control组相比:Model组小鼠海马组织中的TNF-α、IL-1β、IL-10等脑神经炎症指标和HSF1、HSP70均明显上升;各组小鼠Bcl-2蛋白表达均有不同程度的下调、Bax蛋白和c-Caspase-3蛋白表达均有不同程度的上调、均有不同程度的上调,Model组小鼠尤其明显,而YZ+HL组与Control组的差异不具有统计学意义;Model组小鼠海马组织中的均明显上升。与Model组相比:各给药组小鼠海马组织中的促炎因子TNF-α、IL-1β有明显的下调,IL-10除GGA组的差异具有统计学意义外,其余各给药组与Model组的差异均无统计学意义;各给药组小鼠的Bcl-2蛋白均有上调,Bax蛋白和c-Caspase-3蛋白均有下调;YZ+HL组和GGA组小鼠海马组织中HSF1有明显的上调;其余各给药组与Model组相比,HSP70蛋白的差异均具有高度统计学意义;对YZ+HL和GGA组进行LSD分析,两者在HSF1表达的差异具有统计学意义,HSP70表达的差异无统计学意义。（4）高尔基染色:与Control组比较,Model组小鼠脑组织中神经元数量和树突棘均明显减少,镜下可见CA3和DG区的神经元丢失情况最为明显。与Model组相比,各给药组小鼠脑组织中神经元数量、树突棘数量均有不同程度的增多,各给药组海马区神经元树突棘均有明显增加,其差异均具有统计学意义。结论:1、虚是AD发生的根本,痰、瘀是AD的病理过程中的重要推动因素,痰瘀化热酿毒进一步加速了AD的发生发展。“虚生痰瘀-痰瘀化热-热结酿毒-毒损脑络”是AD发生发展的四个关键过程。2、起于病之始的“因虚生热”和现于病之中的“痰瘀化热”导致了“热”可能是推动AD病变发展的重要因素。3、痰瘀热化酿毒,毒损脑络是AD的最终环节。“痰瘀化热酿毒”的生物学过程可能是错误折叠沉积的Aβ蛋白和异常磷酸化的Tau过度活化了小胶质细胞和星形胶质细胞,诱发了脑神经炎症,促进了SP和NTFs的形成;“毒损脑络”的生物学过程可能是具有神经毒性的寡聚态Aβ蛋白、异常磷酸化的Tau和它们引起的各种致炎因子释放,导致了神经元的凋亡和突触的损伤。“毒”的生物学基础可能是神经损害性错误折叠沉积的Aβ蛋白形成SP和异常磷酸化的Tau形成的NTFs;“热”的生物学基础可能是脑神经炎症反应过程中产生和释放的各种致炎因子。4、痰瘀同治、清热解毒法可以有效改善AD-痰瘀模型小鼠的学习记忆能力和病理改变,其可能的作用机制是通过调控HSP70介导的神经保护机制,抑制了Aβ的生成和沉积、Tau的异常磷酸化,进而抑制了星形胶质细胞和小胶质细胞的激活,减轻了脑神经炎反应,减少了神经元的凋亡,保护了海马神经元和树突棘,发挥了神经保护作用。
高琳琳[6]（2021）在《六味地黄丸含药血清通过Caspase-1/GSDMD-N通路对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤的影响》文中研究指明目的:通过对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型的研究,以Caspase-1/GSDMD-N为切入点,探讨六味地黄丸含药血清对SH-SY5Y细胞焦亡的影响。材料与方法:1.将30只健康的SD大鼠,适应性喂养2～3天后,随机平均分为2组,即正常对照组和六味地黄丸组。每组各15只,分笼饲养。根据人与大鼠体表面积有效剂量换算,六味地黄丸组用含六味地黄丸生药量1.18 g/kg的六味地黄丸粉水溶液灌胃,正常对照组用同等体积量的双蒸水灌胃。1天2次,持续灌胃5天。最后一次灌胃2h后,2组同时经腹主动脉进行采血,分离出血清,作为正常鼠血清与含药鼠血清以备用。2.将SH-SY5Y细胞分为3组:正常对照组、模型组、六味地黄丸含药血清组。正常对照组与模型组给予含有10%正常鼠血清的DMEM高糖培养基培养,六味地黄丸含药血清组给予含有10%六味地黄丸含药鼠血清的DMEM高糖培养基培养,模型组及六味地黄丸含药血清组分别加入终浓度为20umol/L Aβ1-42寡聚体,继续培养48h。3.采用台盼蓝染色法（Trypan Blue）观察各组细胞形态并计算活细胞率;采用透射电镜（Transmission Electron Microscope,TEM）观察各组SH-SY5Y细胞的形态及结构变化;采用酶联免疫吸附法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA）检测细胞上清液中的白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素18（IL-18）的含量;采用蛋白质印迹法（Western Blot,WB）检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸酶-1（Caspase-1）和消皮素D-N端片段（Gasdermin-D-N,GSDMD-N）的蛋白表达。结果:1.台盼蓝染色法观察各组细胞形态并计算活细胞率:镜下观察,正常对照组细胞形态较好,结构清晰,胞体饱满,有突触,透光度好,成透明状;模型组细胞外形不规则,胞膜不完整,细胞碎裂,见大量碎片流出,细胞成圆形,无突触,死细胞较多,被染成蓝色;含药血清组细胞形态相对较好,结构比较清晰,胞体相对饱满,仅有少量碎片,有突触,少数被染成蓝色。与正常对照组相比,模型组细胞存活率显着降低（P<0.01）,与模型组相比,含药血清组细胞存活率显着增高（P<0.01）。2.透射电镜观察各组SH-SY5Y细胞的形态结构情况:正常对照组的细胞核膜光滑,形态完整、规则,结构清晰;与正常对照组相比,模型组的细胞出现核皱缩,线粒体肿胀,染色质边集现象;与模型组相比,含药血清组的细胞核膜光滑,线粒体肿胀减轻。3.酶联免疫吸附法检测各组细胞上清液中IL-1β和IL-18的含量比较结果:与正常对照组相比,模型组上清液IL-1β和IL-18的含量显着增多（P<0.01）;与模型组相比,含药血清组上清液IL-1β和IL-18的含量显着减少（P<0.01）。4.蛋白质印迹法检测各组细胞Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达的结果:与正常对照组相比,模型组Caspase-1和GSDMD-N的蛋白表达显着增高（P<0.01）;与模型组相比,含药血清组Caspase-1和GSDMD-N的蛋白表达显着降低（P<0.01）。结论:1.六味地黄丸含药血清可以明显改善Aβ1-42诱导SH-SY5Y细胞的损伤状态,对损伤的SH-SY5Y细胞具有保护作用。2.六味地黄丸含药血清可以通过调节Caspase-1/GSDMD-N通路抑制细胞焦亡,进而抑制细胞免疫炎性反应,起到防治AD的作用。
陈思馨[7]（2020）在《健脾益智法调节AD大鼠脑内尿素代谢的作用机制研究》文中研究表明理论研究部分,目的:旨在从“浊邪”在脑中异常堆积导致阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）的角度探讨该病的发病机制及防治方法,通过用中医理论逐条分析AD的症状,分析脑的生理病理特点,阐明AD病位在脑,与脾胃关系密切,探讨脾胃与AD的关系,最终得出健脾益智法可以通过脾胃的功能改善浊邪在脑中的异常堆积状况,达到治疗AD的理论依据。方法:回顾和总结了中医学对于AD相关症状的记载与认识,将中医理论的认知过程与AD认知衰退量表相结合,利用解剖学和中医传统理论结合,梳理脑与五脏的关联及脑的生理病理特点,归纳和分析脾胃与AD的内在联系,结合健脾益智汤组方分析及导师团队前期研究,为健脾益智法从祛浊角度治疗AD提供了理论依据。结果:在中医理论系统中,AD病名虽未被直接提出,但AD的症状都有相关描述,AD的认知衰退量表GDS与《内经》中描述的认知过程密切相关,病位在脑的原因与脑的生理病理特性相关,其发病与五脏皆有联系,但脾胃功能失常是其根本的病因。无论是从脾胃是后天之本,负责保障其他脏腑的正常生理功能运行,或是脾胃自身的主运化,主升清降浊的功能,亦或者现代的实验或临床研究,都可为从脾胃论治AD提供详实的依据。健脾益智汤从认知衰退过程,脑的病理特性论治AD,以健脾益气,升清降浊为基本治法,在基础和临床研究中均表现出较好的疗效,健脾益智汤中所含药物也对AD有着有益的成分,可以发挥联合靶向作用,提高疗效。实验研究部分,目的:通过构建AD大鼠模型,采用行为学、脲酶法、聚合酶链式反应、酶联免疫吸附剂测定法、蛋白检测法,旨在观察和分析健脾益智汤对模型大鼠学习记忆能力、脑内尿素含量、相关尿素转运蛋白及基因、尿素循环相关酶指标的影响,探讨和分析健脾益智汤对改善模型大鼠学习记忆能力的影响,及可能机制。方法:采用SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、健脾益智汤组、吡拉西坦组。采用海马区注射A β1-40的方法制备AD实验动物模型。各组术后第2周起开始灌胃,分别持续7天,14天,28天,14.4ml/kg/d,每日1次,西药组给与吡拉西坦,加生理盐水制成混悬液,14.4ml/kg/d,每日一次,其余各组给予同等剂量的生理盐水。采用Morris水迷宫评价各组大鼠学习记忆能力,观察和探健脾益智法对模型大鼠学习记忆的影响。采用脲酶法观察和分析各组大鼠脑内尿素含量,实时荧光定量PCR法检测SLC14A1基因mRNA表达情况,Western blot法检测UTB蛋白含量,ELISA法检测尿素循环相关酶ARG、OTC、CPS、ASS、ASL含量,从尿素代谢角度探讨健脾益智汤改善模型大鼠学习记忆障碍的可能机制。结果:1.Morris水迷宫:在治疗7天、14天、28天组中,模型组定位航行逃避潜伏期明显延长,空间探索实验穿台次数明显减少,目标象限探索时间明显减低,与对照组比较,有显着性差异（P<0.01）;与模型组相比,健脾益智汤组与吡拉西坦组逃避潜伏期及穿台次数明显增多（P<0.01或P<0.05）,且健脾益智汤组的改善效果随着治疗天数的增加而有所增强。2脲酶法检测:在治疗7天、14天、28天组中,模型组脑内尿素含量明显增加,与对照组比较,有显着性差异（P<0.01）;与模型组相比,健脾益智汤组与吡拉西坦组可有效降低大鼠脑内尿素含量（P<0.01或P<0.05）,且健脾益智汤组的改善效果随着治疗天数的增加而有所增强。3.实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测:在治疗7天、14天、28天组中,与对照组比较,模型组脑内SLC14A1基因mRNA相对表达水平与UTB蛋白含量均有明显降低（P<0.01）。在治疗7天组中,与模型组相比,健脾益智汤组与吡拉西坦组对SLC14Al和UTB均无统计学意义上的差异（P>0.05）。在14天组和28天组中,健脾益智汤组与吡拉西坦组相比于模型组,均能一定程度的升高SLC14A1mRNA相对表达水平和UTB蛋白含量（P<0.05或P<0.01）。通过对7天,14天和28天不同时间节点的各组大鼠脑内SLC14AlmRNA比较,可发现各组均无显着升高或降低,差异无统计学意义（P>0.05）,而对比UTB含量,治疗28天的健脾益智汤组和吡拉西坦组均比治疗7天时升高更多（P<0.05）。4.酶联免疫吸附检测:在治疗7天、14天、28天组中,与对照组比较,模型组脑内ARG、ASS含量均有明显升高（P<0.01或P<0.05）,ASL含量有所下降,但无统计学意义。与模型组相比,在治疗7天时,健脾益智汤组与吡拉西坦组ARG、ASS含量有所下降,ASL含量有所升高,但无统计学意义（P>0.05）;在治疗14天和28天时,健脾益智汤组与吡拉西坦组ARG、ASS含量明显下降（P<0.01或P<0.05）,ASL含量有所上升,但无统计学意义（P>0.05）。通过对7天,14天和28天不同时间节点的各组大鼠脑内ARG、ASS、ASL含量比较,可发现对照组,假手术组,模型组均无显着升高或降低（P>0.05）,健脾益智汤组和吡拉西坦组均有随着治疗时间增加而降低效果更佳,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1.AD各症状在中医理论中均有描述,评价AD认知功能的认识衰退量表GDS与《内经》中认知过程各阶段相吻合,AD的病位在脑,脑因其独特的生理病理特点,与五脏的功能密切相关,而五脏的正常运行又赖于后天之本脾胃,故在防治AD时,应重视脾胃的调节。2.浊邪阻滞是AD发病的重要病机,脑内过量尿素的堆积是浊邪的一种,脾胃主升清降浊,从脾胃论治AD有据可依,健脾益智汤可通过组方药物的协同作用,调节脾胃功能,使清浊升降相因,对AD发挥整体治疗效果。3.大鼠颅内海马区注射Aβ 1-40造模方式成功构建了 AD模型,健脾益智汤可有效改善AD大鼠学习记忆能力;4.模型大鼠出现脑内尿素含量升高,健脾益智汤可能通过上调SLC14A1基因和UTB蛋白表达,提高尿素转运能力,或是通过下调ARG、ASS酶活性,使尿素生成减少或降低炎症细胞因子的表达水平而达到改善学习记忆障碍的作用。5.健脾益智汤对AD模型大鼠的行为学及脑内尿素水平改善与用药时间正相关,故通过健脾胃而益智需要一定的服药周期。
王名超[8]（2020）在《基于数据挖掘的老年期痴呆病患者中医证型及组方用药规律分析》文中研究表明目的:探讨治疗老年期痴呆病的中医证型与组方用药规律。为中医临床治疗老年期痴呆病提供思路和参考。方法:本研究包括综述和数据挖掘两部分。综述从中医对老年期痴呆的认识,中医治疗方法,现代医学治疗方法等方面进行阐述。数据挖掘:对2014年—2019年于山东中医药大学附属医院老年医学科（保健科）和脑病科住院的老年期痴呆病患者进行统计,通过医院电子病历系统进行处方统计。然后运用中医传承辅助平台（2.5）,采用复杂系统熵聚类、关联规则Apriori等无监督数据挖掘方法对中医处方进行数据挖掘。分析近年来该院治疗老年期痴呆的证型及组方用药规律。结果:经过筛选,整理出痰瘀阻络型、脾肾两虚型、痰浊蒙窍型、髓海不足型、心肝阴虚型、瘀血内阻型6型共300首方剂。治疗痰瘀阻络型老年期痴呆病91首处方中的高频中药有:川芎、炒桃仁、白术、黄芪、茯苓等,分析出常用配伍药对,提取10个核心组合,进一步得出5首新方。治疗脾肾两虚型老年期痴呆病65首处方中高频中药有:白术、茯苓、党参、黄芪、石菖蒲等,分析出常用配伍药对,提取12个核心组合,进一步得出6首新方。治疗痰浊蒙窍型老年期痴呆病50首处方中高频中药有:茯苓、清半夏、白术、石菖蒲、陈皮等,分析出常用配伍药对,提取12个核心组合,进一步得出6首新方。治疗髓海不足型老年期痴呆病45首处方中高频中药有:酒萸肉、熟地黄、茯苓、山药、石菖蒲等,分析出常用配伍药对,提取12个核心组合,进一步得出6首新方。治疗心肝阴虚型老年期痴呆病33首处方中高频中药有:甘草、生地黄、白芍、玄参、麦冬等,分析出常用配伍药对,提取6个核心组合,进一步得出3首新方。治疗瘀血内阻型老年期痴呆病16首处方中高频中药有:炒桃仁、川芎、黄芪、甘草、茯苓等,分析出常用配伍药对,提取6个核心组合,进一步得出3首新方。结论:通过对研究结果分析,总结出治疗老年期痴呆病的中医临床证型及组方用药规律,主要有痰瘀阻络、痰浊蒙窍、瘀血内阻3个邪实为主的证型,脾肾两虚、髓海不足、心肝阴虚3个正虚为主的证型。总结出:方药病证对应、祛痰化瘀为主、补肾不忘健脾、祛邪扶正兼用、安神开窍贯穿始终等组方用药规律,供临床参考。
李佳美[9]（2020）在《针药并举疗法对阿尔茨海默病模型小鼠神经病理影响的研究》文中进行了进一步梳理目的:本研究以“肾脑相济”理论为基础,对快速老化SAMP8小鼠针刺“百会”、双侧“肾俞”、双侧“三阴交”的基础上加用中药补肾活血汤灌胃,观察补肾活血针药并举疗法对SAMP8小鼠的干预作用。通过观察针药并举疗法对SAMP8小鼠大脑皮层Aβ、p-tau蛋白的影响,从神经病理角度探讨针药并举疗法治疗阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease,AD）的效果,进而为中医药治疗AD提供证据支持。材料与方法:选用30只清洁级7月龄雄性SAM种系小鼠,其中24只快速老化SAMP8小鼠以及6只抗快速老化SAMR1小鼠。将24只SAMP8小鼠随机分为模型组、针刺组、中药组、针药组,每组6只。将6只同月龄SAMR1小鼠作为对照组。针刺组针刺“百会”、双侧“肾俞”、双侧“三阴交”,电针选用连续波,频率为2Hz,电流0.6m A,持续20min,1次/d;中药组补肾活血汤灌胃,0.2ml/次,1次/d;针药组同时给予针刺与中药的治疗方式。对照组和模型组给予同等程度的抓取与固定并给予蒸馏水灌胃,0.2ml/次,1次/d,连续治疗4周。治疗结束后采用Morris水迷宫实验和筑巢实验检测小鼠行为学改变,采用HE染色观察小鼠大脑皮层神经元形态学变化,采用免疫组化法和ELISA法检测Aβ蛋白表达;采用免疫组化法和western blot法检测tau蛋白表达。结果:1.Morris水迷宫实验结果表明:可视平台实验中各组小鼠逃避潜伏期及游泳速度无明显差异（P>0.05）。隐蔽平台实验中随着训练时间的增加,小鼠的训练潜伏期均有所减少。与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期时间显着增加（P<0.05）;与模型组相比,针刺组、中药组、针药组逃避潜伏期时间显着减少（P<0.05）;与针刺组、中药组相比,针药组逃避潜伏期时间有降低趋势,但无统计学意义（P>0.05）。空间探索实验中,与对照组相比,模型组小鼠穿越平台次数显着减少（P<0.05）;与模型组相比,针刺组、中药组、针药组小鼠穿越平台次数显着增加（P<0.05）;针药组与针刺组和中药组相比差异无统计学意义（P>0.05）。筑巢实验结果显示:与对照组相比,模型组小鼠筑巢实验评分明显降低（P<0.05）;与模型组相比,中药组评分明显升高（P<0.05）,针刺组和针药组与模型组相比虽有升高趋势,但无统计学意义（P>0.05）。2.小鼠大脑皮层HE染色结果显示:对照组小鼠大脑皮层的神经元结构完整,排列整齐,核染色清楚且均匀;模型组小鼠大脑皮层神经细胞数量减少,排列散乱,不规则,出现核固缩现象;针刺组、中药组和针药组小鼠大脑皮层神经元数量增多,排列较为规则整齐,结构清晰。说明针刺组、中药组和针药组均能改善SAMP8小鼠大脑皮层神经元的损伤和核固缩现象。3.采用免疫组化法和ELISA法检测各组小鼠大脑皮层内Aβ表达。Aβ免疫组化结果显示,对照组SAMR1小鼠大脑皮层神经元形态完整,排列有序,无明显Aβ阳性染色;模型组SAMP8小鼠大脑皮层Aβ阳性染色细胞数量较对照组明显增多,在神经元核周质内表达,呈棕褐色（P<0.05）;针刺组、中药组和针药组SAMP8小鼠大脑皮层Aβ阳性染色细胞数量较模型组有不同程度减少,且染色较淡（P<0.05）;而针刺组、中药组和针药组之间,三组SAMP8小鼠大脑皮层Aβ阳性染色细胞数量没有显着性差异（P>0.05）。ELISA法检测Aβ蛋白表达,结果显示与对照组相比,模型组SAMP8小鼠大脑皮层内的Aβ含量明显增高（P<0.05）;与模型组小鼠相比,3个治疗组SAMP8小鼠大脑皮层内Aβ水平有所下降,差异有统计学意义（P<0.05）;而针刺组、中药组和针药组之间,三组SAMP8小鼠大脑皮层内Aβ的含量没有显着性差异（P>0.05）。4.采用免疫组化法和western blot法检测各组小鼠大脑皮层内p-tau表达。p-tau免疫组化结果显示,p-tau阳性细胞胞质体积较大,多呈棕黄色或棕褐色,表达主要出现在神经元的核周质内。对照组SAMR1小鼠大脑皮层有较少神经元出现p-tau阳性表达;与对照组SAMR1小鼠相比,模型组SAMP8小鼠p-tau阳性染色细胞数量明显增加,阳性细胞p-tau染色较深（P<0.05）;与模型组SAMP8小鼠相比,针刺组、中药组和针药组SAMP8小鼠p-tau阳性染色细胞数量和染色强度均有不同程度的减少,接近对照组（P<0.05）。western blot法检测SAMP8小鼠大脑皮层p-tau蛋白的表达,结果显示与对照组SAMR1小鼠相比,模型组小鼠p-tau的蛋白含量明显升高（P<0.05）;与模型组SAMP8小鼠相比,针刺组、中药组和针药组p-tau表达水平明显降低（P<0.05）;针刺组、中药组、针药组间两两对比无明显差异,无统计学意义（P>0.05）。结论:1针药并举疗法可有效改善SAMP8小鼠的学习记忆功能;2针药并举疗法可有效降低SAMP8小鼠大脑皮层Aβ表达;3针药并举疗法可有效减少SAMP8小鼠大脑皮层p-tau蛋白表达;4针药并举疗法对SAMP8小鼠神经病理改变有抑制作用,但与针刺组及中药组相比无显着性差异。
谢苗[10]（2018）在《改良三甲散通过调控神经炎症与自噬及凋亡治疗老年性痴呆病的机制研究》文中认为老年性痴呆病即阿尔茨海默病是临床常见的神经退行性疾病,其发病隐匿、病因不明、病机复杂、症状多样,临床主要以认知障碍、精神异常、行为改变和功能减退为特点,目前尚无特效治疗方法。中医学对本病的辨证治疗历史悠久,特色独具,具有一定研究价值。本文文献研究部分首先梳理了古今中医学家对本病病名、症状、病机、辨证论治的认识,古代医家认为本病为本虚标实之证,髓减脑空、神机失灵,五脏虚损、气化不足,五神失用、七情内伤,痰浊阻窍、瘀血阻络等是痴呆病的基本病机,治疗多采用养心补肾生精、补心健脾安神、填精益髓增智、化痰逐瘀开窍等方法,侧重于以调补心肾为主。现代医家继承并发展了古人对痴呆的认识,明确了老年性痴呆病名及症状,辨治仍以本虚标实为主线,本虚强调肾、髓、脑的关系,标实强调痰、瘀、毒的蓄积,治则以补肾充髓养脑为主,兼顾祛痰化瘀逐毒。治疗时虽有补虚、化痰、扶阳、逐瘀、祛毒等的偏重,但总的治法还不离补肾填精生髓,滋肝补肾益髓,温肺补肾填髓,养心健脾化髓,化痰逐瘀通髓,解毒通络充髓,使脑窍通,脑髓充,脑神得养,神机得用。文章进一步回顾了现代中医学运用单味中药、中药复方及针灸等方法治疗老年性痴呆病的临床与基础实验研究,概述了西医学对本病的认识和治疗,梳理了自噬与老年性痴呆病的关系,以期对中医治疗老年性痴呆病有所帮助。最后对改良三甲散治疗老年痴呆病的理论机制进行探讨并梳理了其临床及基础研究概况,认为改良三甲散是依据老年性痴呆病肾虚髓减、痰瘀阻窍的基本病机而设的有效方,能补肝肾之阴津,充脑窍之精髓,祛痹阻之痰浊、化凝滞之瘀血,具有良好的应用前景。实验研究部分以原代培养的小胶质细胞、传代BV2细胞及PC12细胞为观察对象,探讨神经炎症与自噬的关系及对神经元细胞毒性及凋亡的影响。首先培养原代小胶质细胞并用免疫荧光方法鉴定其纯度,用MTT方法检测LPS对小胶质细胞活性的影响,用WB实验方法确定LPS对BV2细胞产生自噬作用浓度及时间。用CCK-8法检测含药脑脊液等药物对小胶质细胞活性的影响,用WB方法检测改良三甲散含药脑脊液作用后BV2细胞LC3、Beclinl、P62的表达,用ELISA方法检测原代小胶质细胞上清中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4、IL-10的水平,用免疫荧光方法观察原代小胶质细胞自噬小体的变化,用透射电镜观察原代小胶质细胞自噬超微结构的变化,用WB方法检测BV2细胞PI3K/AKT/mTOR信号途径蛋白的表达,观察各指标的变化。然后将各组小胶质细胞培养上清作为条件培养液作用于PC12细胞,分别用WB和RT-PCR方法检测用药24h后PC12细胞APP、BACE1、BAX、BCL-2、Caspase-3蛋白和mRNA的水平,并用流式细胞术检测用药后PC12细胞的凋亡情况。实验结果显示,原代小胶质细胞培养纯度达到99%,可用于后续实验。LPS对小胶质细胞的毒性呈浓度依赖性增加,5pg/mlLPS作用于小胶质细胞24小时可以使其自噬蛋白LC3II的水平处于二次稳定峰值,以此作为后续造模条件。改良三甲散含药脑脊液对小胶质细胞具有保护作用,可明显提高细胞的存活率,缓解LPS等药物对细胞的毒性作用。与模型组相比,改良三甲散含药脑脊液可以通过下调LC3、Beclin1、PI3K、p-AKT、IL-1β、IL-6、TNF-α水平,上调 P62、p-mTOR、IL-4、IL-10 的表达,减少小胶质细胞中自噬小体的数量,调节自噬超微结构的变化,改善小胶质细胞的神经炎症和过度自噬反应。改良三甲散含药脑脊液作为条件培养液可以降低PC12细胞APP、BACE1、Bax、Caspase-3的蛋白和mRNA的水平,上调Bcl-2蛋白和mRNA的表达,缓解神经炎症和过度自噬反应引起的细胞凋亡。提示改良三甲散含药脑脊液可能通过调节Beclin1依赖的PI3K/AKT/mTOR信号途径调节神经炎症和过度自噬,对抗炎症和自噬过激诱发的细胞凋亡,从而提高对神经元细胞的保护作用,为进一步研究改良三甲散治疗老年性痴呆病的作用机制提供参考方向。
二、肾为先天之本与老年痴呆相关基因研究的启示（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、肾为先天之本与老年痴呆相关基因研究的启示（论文提纲范文）
（1）中医“益智”理论研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 文献综述 “益智”现代研究概况 |
| 综述参考文献 |
| 前言 |
| 1 “智”的概念 |
| 1.1 “智”的含义 |
| 1.2 现代医学对智力的认识 |
| 2 中医对“智”的认识 |
| 2.1 《黄帝内经》对“智”的认识 |
| 2.2 “智”与五脏 |
| 2.3 “智”与五神 |
| 2.4 “智”与精、气血津液 |
| 2.5 “智”与脑 |
| 3 “智”的减弱 |
| 3.1 “智”的生理性减弱表现 |
| 3.2 “智”的生理性减弱因素 |
| 3.3 “智”的病理性减弱表现 |
| 3.4 “智”的病理性减弱因素 |
| 4 “益智”理论源流 |
| 4.1 “益”字源流考证 |
| 4.2 “益智”源流考 |
| 5 “益智”理论研究 |
| 5.1 调节脏腑以“益智” |
| 5.2 调节气血津液以“益智” |
| 6 “益智”的干预方法研究 |
| 6.1 方药益智法研究 |
| 6.2 针灸益智法研究 |
| 6.3 养生益智法研究 |
| 7 益智理论对现代的指导意义 |
| 7.1 维持智力正常状态 |
| 7.2 恢复减弱的智力 |
| 7.3 提升智力至理想水平 |
| 结论 |
| 正文参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）还脑益聪方通过干预PS/γ-分泌酶/α-Nrxn 1通路调节阿尔茨海默病突触可塑性的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 PS/γ-分泌酶/α-Nrxn 1通路调控阿尔茨海默病的研究进展 |
| 1 早老素基因突变假说 |
| 2 Nrxn及突触后神经连接蛋白在突触可塑性中的作用 |
| 2.1 Nrxn蛋白在突触可塑性调节方面起着组织者的作用 |
| 2.2 α-Nrxn1与突触后相互作用蛋白结合共同调节突触可塑性 |
| 3 PS调节Nrxn在突触可塑性中的功能 |
| 4 PS1/2基因敲除动物模型的研究进展 |
| 4.1. 脑组织形态学改变 |
| 4.2. 认知功能和情绪改变 |
| 4.3. 神经炎症反应和神经元凋亡 |
| 4.4. 突触可塑性损伤 |
| 综述二 “虚-瘀-浊-毒”在阿尔茨海默病中的病机演变规律 |
| 1 AD始发于肾虚 |
| 2 AD进展于浊、瘀等病理产物的蓄积 |
| 3 AD恶化于毒邪的转化 |
| 4 “虚-瘀-浊-毒”病机演变过程的生物学基础 |
| 总结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 基于AMSTAR-2质量评价和GRADE证据分级的中医药治疗阿尔茨海默病系统评价/meta分析再评价 |
| 1 研究背景 |
| 2 资料与方法 |
| 2.1 文献检索 |
| 2.2 纳入和排除标准 |
| 2.3 文献筛选和资料提取 |
| 2.4 质量评估 |
| 2.5 再评价指标 |
| 2.6 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 文献筛选结果 |
| 3.2 纳入文献基本特征 |
| 3.3 AMSTAR-2质量评价结果 |
| 3.4 GRADE证据质量分级 |
| 3.5 结局指标再评价 |
| 4 讨论 |
| 4.1 中医药治疗AD疗效显着 |
| 4.2 中医药治疗AD的系统评价/meta分析的方法学质量有待提高 |
| 4.3 中医药治疗AD的系统评价/meta分析的证据等级较低 |
| 4.4 中医药治疗AD的安全性尚待确定 |
| 4.5 对未来中医药治疗AD疗效的系统评价/Meta分析的建议 |
| 4.6 研究的优势和局限性 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 附表1 Pubmed检索策略 |
| 附表2 AMSTAR-2详细清单 |
| 附表3 AMSTAR-2详细清单 |
| 附表4 AMSTAR-2详细清单 |
| 附表5 排除文献及理由 |
| 第三部分 还脑益聪方通过PS/-分泌酶/α-Nrxn 1通路调控阿尔茨海默病突触可塑性的实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 水迷宫实验 |
| 3.2 跳台实验 |
| 3.3 兴奋性突触后电位长时程增强时间 |
| 3.4 海马CA1区神经元形态 |
| 3.5 各组APP、Aβ_(1-40)、A β_(1-42)、γ分泌酶水平 |
| 3.6 各组α-Nrxn1与突触后连接蛋白的结合作用 |
| 3.7 各组α-Nrxn1信号通路的蛋白水平 |
| 3.8 各组α-Nrxn 1信号通路的基因表达 |
| 4 讨论 |
| 4.1 HYD可提高模型鼠学习记忆能力 |
| 4.2 HYD通过提高LTP时间改善突触可塑性 |
| 4.3 HYD发挥保护神经元功能 |
| 4.4 PScDKO小鼠的AD样表型与Aβ沉积无关 |
| 4.5 PS功能突变未影响α-Nrxn1与突触后蛋白的绑定作用 |
| 4.6 HYD通过调节α-Nrxn1及突触后相关蛋白和基因水平改善突触可塑性 |
| 5 小结 |
| 6 创新点 |
| 7 存在问题与不足 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附件 |
（3）绝经后妇女骨量丢失阶段证候分析及绝经后骨质疏松症肾阴虚证关联基因CLCF1的机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 绝经后妇女骨量丢失阶段证候分析 |
| 研究对象与方法 |
| 1 研究对象的来源及选择 |
| 1.1 研究对象的来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 问卷调查 |
| 2.2 骨密度检测 |
| 2.3 中医辨证 |
| 3 统计学方法 |
| 4 质量控制 |
| 结果 |
| 1 一般资料比较 |
| 1.1 各阶段一般资料 |
| 1.2 低骨量阶段各年龄段一般资料 |
| 1.3 骨质疏松阶段各年龄段一般资料 |
| 1.4 严重骨质疏松阶段各年龄段一般资料 |
| 2 骨密度比较 |
| 2.1 各阶段骨密度比较 |
| 2.2 低骨量阶段各年龄段骨密度比较 |
| 2.3 骨质疏松阶段各年龄段骨密度比较 |
| 2.4 严重骨质疏松阶段各年龄段骨密度比较 |
| 3 主要症状比较 |
| 3.1 各阶段主要症状比较 |
| 3.2 低骨量阶段各年龄段主要症状比较 |
| 3.3 骨质疏松阶段各年龄段主要症状比较 |
| 3.4 严重骨质疏松阶段各年龄段主要症状比较 |
| 4 虚证比较 |
| 4.1 各阶段虚证比较 |
| 4.2 低骨量阶段各年龄段虚证比较 |
| 4.3 骨质疏松阶段各年龄段虚证比较 |
| 4.4 严重骨质疏松阶段各年龄段虚证比较 |
| 5 肾虚兼证比较 |
| 5.1 各阶段肾虚兼证比较 |
| 5.2 低骨量阶段各年龄段肾虚兼证比较 |
| 5.3 骨质疏松阶段各年龄段肾虚兼证比较 |
| 5.4 严重骨质疏松阶段各年龄段肾虚兼证比较 |
| 6 常见证型比较 |
| 6.1 各阶段常见证型比较 |
| 6.2 低骨量阶段各年龄段常见证型比较 |
| 6.3 骨质疏松阶段各年龄段常见证型比较 |
| 6.4 严重骨质疏松阶段各年龄段常见证型比较 |
| 讨论 |
| 1 一般资料的特征分析 |
| 2 骨密度的特征分析 |
| 3 病证结合模式下,骨量丢失阶段中医证候的特征分析 |
| 4 创新与不足 |
| 4.1 创新 |
| 4.2 不足 |
| 5 小结 |
| 第二部分 PMOP肾阴虚证与CLCF1 的关联性分析 |
| 实验材料与研究方法 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 主要试剂与耗材 |
| 1.2 实验相关溶液配制 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 研究对象的筛选和资料收集 |
| 2.1 研究对象的来源 |
| 2.2 诊断标准 |
| 2.3 纳入标准 |
| 2.4 排除标准 |
| 2.5 分组依据及说明 |
| 3 研究方法 |
| 3.1 问卷调查 |
| 3.2 骨密度检测 |
| 3.3 血样采集 |
| 3.4 实时荧光定量PCR |
| 3.5 蛋白质免疫印迹法 |
| 4 统计学方法 |
| 5 样本量估算 |
| 6 质量控制 |
| 7 伦理审查 |
| 结果 |
| 1 CLCF1与PMOP肾阴虚证的关联性分析 |
| 1.1 基本情况 |
| 1.2 骨密度比较 |
| 1.3 CLCF1表达水平与证型的关联性分析 |
| 2 CLCF1与骨质疏松症的关联性分析 |
| 2.1 基本情况 |
| 2.2 CLCF1与骨量丢失的关联性分析 |
| 2.3 CLCF1与骨密度及骨质疏松症发生的关联性分析 |
| 3 CLCF1与骨折发生的关联性分析 |
| 4 CLCF1与生活习惯、疾病的相关性分析 |
| 讨论 |
| 1 PMOP肾阴虚证与CLCF1的关联性分析 |
| 2 CLCF1与骨密度、骨质疏松症、骨折发生的关联性分析 |
| 3 创新与不足 |
| 3.1 创新 |
| 3.2 不足 |
| 4 小结 |
| 第三部分 CLCF1对OPG/RANKL/RANK系统及细胞生物学行为的影响 |
| 实验材料与研究方法 |
| 1 细胞系来源 |
| 2 主要试剂与材料 |
| 2.1 主要试剂与耗材 |
| 2.2 实验相关溶液配制 |
| 2.3 主要仪器 |
| 3 方法 |
| 3.1 细胞培养和细胞传代 |
| 3.2 CLCF1基因的敲除 |
| 3.3 sgRNA活性检测 |
| 3.4 CLCF1基因的过表达 |
| 3.5 实时荧光定量PCR |
| 3.6 蛋白质免疫印迹法 |
| 3.7 酶联免疫吸附测定 |
| 3.8 细胞增殖实验 |
| 3.9 细胞侵袭实验 |
| 3.10 细胞迁移实验 |
| 3.11 细胞凋亡实验 |
| 4 统计学方法 |
| 结果 |
| 1 CLCF1的过表达、敲除结果 |
| 1.1 过表达慢病毒转染效率的检测 |
| 1.2 CAS9 sgRNA活性检测结果 |
| 1.3 CLCF1调控后的mRNA表达变化 |
| 1.4 CLCF1调控后蛋白表达变化 |
| 1.5 CLCF1调控后蛋白含量变化 |
| 2 CLCF1对OPG、RANKL及干扰素 α、干扰素 γ的影响 |
| 2.1 CLCF1对OPG、RANKL及干扰素 α、干扰素 γmRNA表达的影响 |
| 2.2 CLCF1对OPG、RANKL及干扰素 α、干扰素 γ蛋白表达的影响 |
| 2.3 CLCF1对OPG、RANKL蛋白含量的影响 |
| 3 CLCF1对细胞生物学行为的影响 |
| 3.1 CLCF1对细胞增殖的影响 |
| 3.2 CLCF1对细胞迁移、侵袭的影响 |
| 3.3 CLCF1对细胞凋亡的影响 |
| 讨论 |
| 1 CLCF1对OPG/RANKL/RANK系统的影响 |
| 2 CLCF1对IFNα、IFNγ的影响 |
| 3 慢病毒载体、Crispr/Cas9 基因编辑技术及THP-1 细胞系的选择 |
| 4 CLCF1对细胞生物行为学的影响 |
| 5 创新与不足 |
| 5.1 创新 |
| 5.2 不足 |
| 6 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 文献综述 骨质疏松症的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（4）阿尔茨海默病关键基因筛选及龟龄集干预作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 从五脏探讨阿尔茨海默病的中医治疗 |
| 1 古籍中有关AD的认识 |
| 2 人以五脏为本 |
| 3 阿尔茨海默病本虚于五脏 |
| 4 阿尔茨海默病标实与五脏的关系 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 生物信息学在阿尔茨海默病中的应用进展 |
| 1 阿尔茨海默病与基因组学 |
| 2 阿尔茨海默病与蛋白质组学 |
| 3 阿尔茨海默病与代谢组学 |
| 4 阿尔茨海默病与药物靶点预测 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第一章 临床研究 |
| 前言 |
| 第一节 研究对象与方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 病例选择 |
| 3 试验方法 |
| 第二节 临床研究结果 |
| 1 纳入病例情况 |
| 2 基线资料分析 |
| 3 治疗后疗效比较 |
| 4 安全性评价 |
| 第三节 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二章 AD关键基因筛选验证及龟龄集干预作用 |
| 第一节 材料与方法 |
| 1 筛选AD关键基因 |
| 2 RT-PCR检测目的基因表达 |
| 3 技术路线 |
| 第二节 研究结果 |
| 1 AD差异表达基因的筛选 |
| 2 DEGs的WGCNA分析 |
| 3 DEGs的GO分析和KEGG分析 |
| 4 PPI网络构建及关键基因筛选 |
| 5 AD脑-血共表达关键基因 |
| 6 关键基因在验证数据集中的表达情况 |
| 7 关键基因的疾病预测能力 |
| 8 PCR检测关键基因 |
| 9 PCR检测龟龄集干预前后关键基因的表达情况 |
| 第三节 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 个人简历 |
（5）痰瘀同治 清热解毒法防治AD的理论探讨及其调控HSP70介导的神经保护机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论探讨 |
| 1.中医学对AD的基本认识 |
| 2.古籍文献中的AD病名浅析 |
| 2.1 侧重症状描述 |
| 2.2 次症掩盖主症 |
| 2.3 兼夹其它疾病 |
| 2.4 名为“痴呆”并非AD |
| 2.5 “痴呆”即指AD相关病证 |
| 3.痰瘀同治、清热解毒法防治AD的理论探讨 |
| 3.1 脏腑虚衰为AD之始 |
| 3.2 内生痰瘀为AD之标 |
| 3.3 化热酿毒为AD之变 |
| 3.4 损伤脑络为AD之末 |
| 4.益智温胆汤源流浅析 |
| 5.黄连解毒汤源流浅析 |
| 6.HSP70 与AD的关系 |
| 6.1 HSP70 功能概述 |
| 6.2 热休克蛋白家族在AD中的作用 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 AD与痰、瘀病证结合动物模型的建立与评价 |
| 1.实验动物及材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验器材及试剂 |
| 2.病证结合动物模型的建立 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 实验动物造模 |
| 3.模型评价 |
| 3.1 Morris水迷宫法检测各组小鼠行为学变化 |
| 3.2 各组小鼠舌色客观变化 |
| 3.3 各组小鼠血液流变学变化 |
| 3.4 各组小鼠血脂变化 |
| 3.5 Western Blot法检测各组小鼠海马组织相关蛋白含量 |
| 4.统计学方法 |
| 5.实验结果 |
| 5.1 Morris水迷宫实验结果 |
| 5.2 舌色客观化比较实验结果 |
| 5.3 血液流变学检测实验结果 |
| 5.4 血脂检测实验结果 |
| 5.5 Western Blot实验结果 |
| 实验二 痰瘀同治、清热解毒法对AD-痰瘀模型小鼠行为学的影响 |
| 1.实验动物及材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验器材 |
| 1.3 实验用药及其制备 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 实验动物造模 |
| 2.3 实验动物给药 |
| 3.行为学检测 |
| 3.1 Morris水迷宫实验 |
| 3.2 跳台实验 |
| 4.统计学方法 |
| 5.实验结果 |
| 5.1 Morris水迷宫实验结果 |
| 5.2 跳台实验结果 |
| 实验三 痰瘀同治、清热解毒法对AD-痰瘀模型小鼠病理改变的影响 |
| 1.实验动物及材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验器材 |
| 1.3 实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 刚果红染色法检测小鼠海马区SP |
| 2.2 甘氨酸银浸镀法检测小鼠海马区NFTs |
| 2.3 透射电镜法观察小鼠海马神经元超微结构 |
| 2.4 Western Blot法检测小鼠海马区AD相关蛋白含量 |
| 3.统计学方法 |
| 4.实验结果 |
| 4.1 刚果红染色实验结果 |
| 4.2 甘氨酸银浸镀实验结果 |
| 4.3 透射电镜实验结果 |
| 4.4 Western Blot实验结果 |
| 实验四 痰瘀同治、清热解毒法对AD-痰瘀模型小鼠脑神经炎症的影响 |
| 1.实验动物及材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验器材 |
| 1.3 实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 免疫荧光标记法检测小鼠相关蛋白表达及共定位关系 |
| 2.2 Western Blot法检测小鼠海马区相关蛋白含量 |
| 2.3 高尔基染色法观察小鼠海马神经元树突棘 |
| 3.统计学方法 |
| 4.实验结果 |
| 4.1 免疫荧光实验结果 |
| 4.2 Western Blot实验结果 |
| 4.3 高尔基染色实验结果 |
| 讨论 |
| 1.病证结合动物模型建立的思路与意义 |
| 2.痰瘀化热酿毒是AD的重要病理过程 |
| 3.痰瘀同治、清热解毒法可改善AD痰瘀模型小鼠的学习记忆能力 |
| 4.痰瘀同治、清热解毒法能有效改善AD痰瘀模型小鼠的病理形态 |
| 5.痰瘀同治、清热解毒法可调控HSP70 介导的神经保护机制 |
| 结语 |
| 1.结论 |
| 2.创新点 |
| 3.研究展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 AD研究进展及热休克蛋白在AD中的作用 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间科研经历、学术成果及获得奖励情况 |
| 致谢 |
（6）六味地黄丸含药血清通过Caspase-1/GSDMD-N通路对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 阿尔茨海默病的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（7）健脾益智法调节AD大鼠脑内尿素代谢的作用机制研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1. 中医学对AD主要症状的认识 |
| 1.1 衰老 |
| 1.2 记忆障碍 |
| 1.3 认知障碍 |
| 1.4 失语 |
| 1.5 精神症状 |
| 2. 中医学对AD病位的认识 |
| 2.1 脑的主要生理功能 |
| 2.2 脑的生理病理特点 |
| 2.3 脑与五脏的关系 |
| 2.4 五脏与AD的关系 |
| 3. 健脾益智法调治AD |
| 3.1 理论基础 |
| 3.2 实验基础 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 健脾益智汤对Aβ1-40所致AD大鼠行为学的影响 |
| 1. 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物制备与给药方法 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2. 方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 AD模型大鼠复制 |
| 2.3 Morris水迷宫实验 |
| 2.4 统计分析方法 |
| 3. 结果 |
| 3.1 Morris水迷宫定位航行实验结果 |
| 3.2 Morris水迷宫空间探索实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 4.1 动物模型的选择 |
| 4.2 Morris水迷宫检测 |
| 4.3 干预方法 |
| 实验二 健脾益智汤对Aβ1-40所致AD大鼠脑内尿素含量的影响 |
| 1. 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物制备与给药方法 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2. 方法 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 标本制备 |
| 2.3 脲酶法检测各组大鼠脑内尿素含量 |
| 2.4 统计方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 实验三 健脾益智汤对Aβ1-40所致AD大鼠脑内SLC14A1基因表达情况及UTB蛋白含量的影响 |
| 1. 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物制备与给药方法 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2. 方法 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 标本制备 |
| 2.3 实时荧光定量PCR法检测各组大鼠大脑中SLC14A1基因相对表达 |
| 2.4 western-blot法检测大鼠脑内UTB含量 |
| 2.5 统计方法 |
| 3. 结果 |
| 3.1 实时荧光定量PCR检测SLC14A1基因mRNA表达情况 |
| 3.2 Western bolt检测各组大鼠脑内UTB蛋白含量 |
| 4. 讨论 |
| 实验四 健脾益智汤对Aβ1-40所致AD大鼠脑内CPS、OTC、ASS、ASL、ARG表达的影响 |
| 1. 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物制备与给药方法 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2. 方法 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 标本制备 |
| 2.3 ELISA法检测大鼠脑内CPS、OTC、ASS、ASL、ARG酶 |
| 3. 结果 |
| 3.1 各组大鼠脑内ARG含量 |
| 3.2 各组大鼠脑内ASS含量 |
| 3.3 各组大鼠脑内ASL含量 |
| 4. 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 查新报告 |
| 论文着作 |
（8）基于数据挖掘的老年期痴呆病患者中医证型及组方用药规律分析（论文提纲范文）
| 提要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 综述 老年期痴呆中西医认识 |
| 1 中医对老年期痴呆的研究 |
| 2 中医治疗现状 |
| 2.1 中药治疗 |
| 2.2 针灸治疗 |
| 2.3 其他治疗方法 |
| 3 近10年中医治疗痴呆规律的研究 |
| 4 现代医学对老年期痴呆发病机制研究 |
| 4.1 阿尔茨海默病(AD)的发病机制 |
| 4.2 血管性痴呆(VD)的发病机制 |
| 5 现代医学治疗现状 |
| 5.1 阿尔茨海默病(AD)的治疗 |
| 5.2 血管性痴呆(VD)的治疗 |
| 参考文献 |
| 第二部分 中医证型及组方用药规律分析 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 收集方剂范围 |
| 1.2 收集方剂标准 |
| 1.3 资料整理 |
| 1.4 病案录入及核对 |
| 1.5 统计方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 痰瘀阻络型老年期痴呆病患者组方用药规律结果与分析 |
| 2.2 脾肾两虚型老年期痴呆病患者组方用药规律结果与分析 |
| 2.3 痰浊蒙窍型老年期痴呆病患者组方用药规律结果与分析 |
| 2.4 髓海不足型老年期痴呆病患者组方用药规律结果与分析 |
| 2.5 心肝阴虚型老年期痴呆病患者组方用药规律结果与分析 |
| 2.6 瘀血内阻型老年期痴呆病患者组方用药规律结果与分析 |
| 讨论 |
| 1 中医对老年期痴呆病的认识 |
| 1.1 中医对老年期痴呆的认识 |
| 1.2 中医对痰瘀阻络型老年期痴呆的认识 |
| 1.3 中医对脾肾两虚型老年期痴呆的认识 |
| 1.4 中医对痰浊蒙窍型老年期痴呆的认识 |
| 1.5 中医对髓海不足型老年期痴呆的认识 |
| 1.6 中医对心肝阴虚型老年期痴呆的认识 |
| 1.7 中医对瘀血内阻型老年期痴呆的认识 |
| 2 本研究各型新方分析 |
| 2.1 痰瘀阻络型 |
| 2.2 脾肾两虚型 |
| 2.3 痰浊蒙窍型 |
| 2.4 髓海不足型 |
| 2.5 心肝阴虚型 |
| 2.6 瘀血内阻型 |
| 3 老年期痴呆病中医处方用药规律小结 |
| 3.1 方药病证对应 |
| 3.2 祛痰化瘀为主 |
| 3.3 补肾不忘健脾 |
| 3.4 祛邪扶正兼用 |
| 3.5 安神开窍贯穿始终 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 发表论文 |
（9）针药并举疗法对阿尔茨海默病模型小鼠神经病理影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 阿尔茨海默病的中医药治疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（10）改良三甲散通过调控神经炎症与自噬及凋亡治疗老年性痴呆病的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1 古代中医对老年性痴呆病的认识 |
| 1.1 病名沿革 |
| 1.2 症状描述 |
| 1.3 病因病机 |
| 1.3.1 髓减脑空,神机失灵 |
| 1.3.2 五脏虚损,气化不足 |
| 1.3.3 五神失用,七情内伤 |
| 1.3.4 痰浊阻窍,瘀血阻络 |
| 1.4 治疗方法 |
| 1.4.1 养心补肾生精 |
| 1.4.2 补心健脾安神 |
| 1.4.3 填精益髓增智 |
| 1.4.4 化痰逐瘀开窍 |
| 2 现代中医对老年性痴呆病认识的丰富和发展 |
| 2.1 现代中医对老年性痴呆病病名和症状的认识 |
| 2.2 现代中医对老年性痴呆病病因和病机的认识 |
| 2.2.1 肾精亏虚,髓海不足 |
| 2.2.2 五脏虚损,七情内伤 |
| 2.2.3 痰瘀阻窍,毒损脑络 |
| 2.3 现代中医对老年性痴呆病诊断和治疗的认识 |
| 2.3.1 临床辨证分型治疗依据 |
| 2.3.2 临床证候要素分型分析 |
| 2.3.3 名老中医辨证治疗本病 |
| 3 中医药治疗老年性痴呆病的现代研究 |
| 3.1 单味中药及其有效成分治疗老年性痴呆病的研究 |
| 3.2 中药复方治疗老年性痴呆病的临床应用研究 |
| 3.3 中西医结合治疗老年性痴呆病的临床研究 |
| 3.4 中药复方治疗老年性痴呆病的基础实验研究 |
| 3.5 针灸治疗老年性痴呆病的临床研究 |
| 4 西医学对老年性痴呆病的认识 |
| 4.1 阿尔兹海默病发病的基本假说 |
| 4.2 阿尔兹海默病的诊断和治疗 |
| 5 细胞自噬与老年性痴呆病的关系 |
| 5.1 细胞自噬发生的基本机制和过程 |
| 5.2 细胞自噬在老年性痴呆病发生发展中的作用 |
| 5.3 调控细胞自噬在老年性痴呆病治疗中的应用前景 |
| 6 改良三甲散治疗老年性痴呆病的研究基础 |
| 6.1 改良三甲散的历史源流 |
| 6.2 改良三甲散的组方特色及用药思路 |
| 6.3 改良三甲散契合中医学对老年性痴呆病病机和治疗的认识 |
| 6.4 改良三甲散治疗老年性痴呆病的现代研究基础 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1 原代细胞培养和鉴定、传代细胞培养及含药脑脊液的制备 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 实验结果 |
| 1.4 讨论 |
| 2 LPS对小胶质细胞毒性检测及诱导细胞产生自噬浓度及时间的确定 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.4 讨论 |
| 3 改良三甲散含药脑脊液对LPS作用的BV2细胞自噬相关蛋白LC3、Beclin1、P62表达的影响 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.4 讨论 |
| 4 改良三甲散含药脑脊液对LPS诱导的原代小胶质细胞产生自噬小体和自噬超微结构变化的影响 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.4 讨论 |
| 5 改良三甲散含药脑脊液调控自噬对LPS诱导原代小胶质细胞炎性因子IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10、TNF-α表达的影响 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.4 讨论 |
| 6 改良三甲散含药脑脊液对LPS作用的BV2细胞PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白表达的影响 |
| 6.1 实验材料 |
| 6.2 实验方法 |
| 6.3 实验结果 |
| 6.4 讨论 |
| 7 改良三甲散含药脑脊液等小胶质细胞条件培养液对作用的PC12细胞APP、BACE1蛋白及mRNA表达的影响 |
| 7.1 实验材料 |
| 7.2 实验方法 |
| 7.3 实验结果 |
| 7.4 讨论 |
| 8 改良三甲散含药脑脊液条件培养液对PC12细胞凋亡的流式检测和凋亡相关BAX、BCL-2、Caspase-3蛋白及mRNA的影响 |
| 8.1 实验材料 |
| 8.2 实验方法 |
| 8.3 实验结果 |
| 8.4 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、肾为先天之本与老年痴呆相关基因研究的启示（论文参考文献）
- [1]中医“益智”理论研究[D]. 张蒙. 中国中医科学院, 2021(02)
- [2]还脑益聪方通过干预PS/γ-分泌酶/α-Nrxn 1通路调节阿尔茨海默病突触可塑性的实验研究[D]. 刘南阳. 中国中医科学院, 2021(02)
- [3]绝经后妇女骨量丢失阶段证候分析及绝经后骨质疏松症肾阴虚证关联基因CLCF1的机制研究[D]. 李健阳. 福建中医药大学, 2021(01)
- [4]阿尔茨海默病关键基因筛选及龟龄集干预作用的研究[D]. 赵明. 北京中医药大学, 2021(08)
- [5]痰瘀同治 清热解毒法防治AD的理论探讨及其调控HSP70介导的神经保护机制研究[D]. 谭爱华. 湖北中医药大学, 2021
- [6]六味地黄丸含药血清通过Caspase-1/GSDMD-N通路对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤的影响[D]. 高琳琳. 辽宁中医药大学, 2021(02)
- [7]健脾益智法调节AD大鼠脑内尿素代谢的作用机制研究[D]. 陈思馨. 山东中医药大学, 2020(01)
- [8]基于数据挖掘的老年期痴呆病患者中医证型及组方用药规律分析[D]. 王名超. 山东中医药大学, 2020(01)
- [9]针药并举疗法对阿尔茨海默病模型小鼠神经病理影响的研究[D]. 李佳美. 辽宁中医药大学, 2020(02)
- [10]改良三甲散通过调控神经炎症与自噬及凋亡治疗老年性痴呆病的机制研究[D]. 谢苗. 南京中医药大学, 2018(12)